Roche羅氏 064027 12001 FastStartEssentialDNAGreenMaster（Roche）

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羅氏Roche總部位于瑞士巴塞爾，是全球在醫(yī)藥和診斷領(lǐng)域，致力于研究并處于領(lǐng)xian地位之一的保健集團(tuán)。羅氏的診斷部門提供了du一無(wú)二的產(chǎn)品品種，為quan世界的研究人員、醫(yī)師、病人、醫(yī)院和實(shí)驗(yàn)室提供多樣化的創(chuàng)新測(cè)試產(chǎn)品及服務(wù)。羅氏診斷在全球有近19,000人員正致力于科研、發(fā)展、產(chǎn)品的市場(chǎng)運(yùn)作和服務(wù)以及一體化的解決方案。

 Roche Fast Start Essential DNA Green Master

Roche羅氏 064027 12001 FastStartEssentialDNAGreenMaster（Roche）  5×100反應(yīng)(20μl)，產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

產(chǎn)品品牌：Roche羅氏

產(chǎn)品貨號(hào)：064027 12001

產(chǎn)品名稱：FastStartEssentialDNAGreenMaster（Roche）

產(chǎn)品規(guī)格：5×100反應(yīng)(20μl)

Roche羅氏 064027 12001 FastStartEssentialDNAGreenMaster（Roche）  5×100反應(yīng)(20μl)，產(chǎn)品說(shuō)明：

FastStart Essential DNA Green Master是一種現(xiàn)成的反應(yīng)混合物，使用LightCycler®Nano和LightCycleer®96儀器上的SYBR Green I檢測(cè)格式。用于8管條或單管中的熱啟動(dòng)PCR。熱啟動(dòng)PCR通過(guò)*小化反應(yīng)開(kāi)始時(shí)非特異性擴(kuò)增產(chǎn)物的形成，顯zhu提高了PCR的特異性和min感性。

應(yīng)用

FastStart Essential DNA Green Master提供試劑，包括SYBR Green I染料，用于使用LightCycler®96儀器和LightCycleer®Nano儀器擴(kuò)增和檢測(cè)DNA。該試劑盒非常適合用于基因檢測(cè)和定量的熱啟動(dòng)PCR分析。

PCR產(chǎn)物的產(chǎn)生可以通過(guò)SYBR Green I熒光信號(hào)的測(cè)量來(lái)檢測(cè)。SYBR Green I染料插入DNA螺旋（Zipper，H.等人，2004）。在溶液中，未結(jié)合的染料顯示很少的熒光；然而，熒光（波長(zhǎng)，530nm）在DNA結(jié)合時(shí)大大增強(qiáng)。因此，在PCR期間，SYBR Green I熒光的增加與產(chǎn)生的雙鏈DNA的量成正比。由于SYBR Green I染料非常穩(wěn)定（在30個(gè)擴(kuò)增周期中僅損失6%的活性），并且LightCycler®96儀器的光學(xué)系統(tǒng)與激發(fā)和發(fā)射波長(zhǎng)相匹配，因此它是測(cè)量總DNA時(shí)的shou選試劑。

在LightCycler®96系統(tǒng)上實(shí)時(shí)PCR期間，SYBR Green I檢測(cè)DNA的基本步驟如下：

在擴(kuò)增開(kāi)始時(shí)，反應(yīng)混合物包含變性DNA、引物和染料。未結(jié)合的染料分子微弱地發(fā)出熒光，產(chǎn)生*小的背景熒光信號(hào)，該信號(hào)在計(jì)算機(jī)分析期間被減去。

引物退火后，少數(shù)染料分子可以與雙鏈結(jié)合。DNA結(jié)合導(dǎo)致SYBR Green I分子在激發(fā)時(shí)發(fā)光的顯著增加。

在伸長(zhǎng)過(guò)程中，越來(lái)越多的染料分子與新合成的DNA結(jié)合。如果連續(xù)監(jiān)測(cè)反應(yīng)，則實(shí)時(shí)觀察熒光的增加。在下一個(gè)加熱周期DNA變性后，染料分子被釋放，熒光信號(hào)下降。

在每個(gè)PCR周期的延伸步驟結(jié)束時(shí)進(jìn)行熒光測(cè)量，以監(jiān)測(cè)擴(kuò)增DNA的增加量。

為了證明只擴(kuò)增了所需的PCR產(chǎn)物，您可以在PCR后進(jìn)行熔化曲線分析。在熔化曲線分析中，反應(yīng)混合物緩慢加熱至95°C，這導(dǎo)致雙鏈DNA熔化，SYBR Green I熒光相應(yīng)降低。儀器持續(xù)監(jiān)測(cè)這種熒光降低，并將其顯示為熔化峰。每個(gè)熔化峰代表特定DNA產(chǎn)物的特征熔化溫度（Tm）（其中DNA為50%雙鏈和50%單鏈）。決定dsDNA Tm的*重要因素是該片段的長(zhǎng)度和GC含量。如果PCR僅產(chǎn)生一個(gè)擴(kuò)增子，熔化曲線分析將僅顯示一個(gè)熔化峰。如果存在引物二聚體或其他非特異性產(chǎn)物，它們將顯示為額外的熔化峰。因此，檢查PCR產(chǎn)物的Tm可以與在凝膠電泳中通過(guò)長(zhǎng)度分析PCR產(chǎn)物進(jìn)行比較。

此產(chǎn)品的工作原理

FastStart Essential DNA Green Master是一種即用即用的反應(yīng)混合物，專門設(shè)計(jì)用于在LightCycler®480 Multiwell Plates 96中應(yīng)用SYBR Green I檢測(cè)格式，或在LightCycler®96儀器上應(yīng)用LightCycler®8-管條（白色）。用于執(zhí)行熱啟動(dòng)PCR。熱啟動(dòng)PCR已被證明通過(guò)*小化反應(yīng)開(kāi)始時(shí)非特異性擴(kuò)增產(chǎn)物的形成，顯著提*了PCR的特異性和min感性（Chou，Q.等人，1992，Kellogg，D.E.等人，1994，Birch，D.E.，1996）。FastStart Taq DNA聚合酶是一種化學(xué)修飾形式的耐熱重組Taq DNA多聚酶，在75°C以下無(wú)活性。這種酶只有在高溫下才有活性，此時(shí)引物不再非特異性結(jié)合。在循環(huán)開(kāi)始之前，酶在單個(gè)預(yù)培養(yǎng)步驟（95°C，5至10分鐘）中被wan全激活（通過(guò)去除阻斷基團(tuán)）。激活不需要其他熱啟動(dòng)技術(shù)典型的額外處理步驟。

  Roche Fast Start Essential DNA Green Master

產(chǎn)品訂購(gòu)信息：

Roche羅氏 064027 12001 FastStartEssentialDNAGreenMaster（Roche）  5×100反應(yīng)(20μl)