AAT Bioquest  20530/20531  Cal-630™ AM

我們北京云肽生物科技有限公司作為AAT Bioquest公司的特約經(jīng)銷商為客戶提供，正規(guī)進口，保證原裝正品，貨期穩(wěn)定的服務(wù)標(biāo)準(zhǔn)。

美國AAT Bioquest Inc.(前身是ABD Bioquest，Inc.)是一家為從事生命科學(xué)研究、診斷研發(fā)及藥物開發(fā)的科學(xué)家研發(fā)、生產(chǎn)和銷售生物分析研究試劑和試劑盒的公司。公司致力于光譜學(xué)檢測領(lǐng)域，包括吸收（顏色），熒光和發(fā)光技術(shù)。AAT Bioquest的產(chǎn)品幫助quan世界的科學(xué)家和生物醫(yī)藥研究者更好的了解生物化學(xué)，免疫學(xué)，細(xì)胞生物學(xué)和分子生物學(xué)等領(lǐng)域。AAT Bioquest會不斷介紹新產(chǎn)品，快速的豐富各個領(lǐng)域的產(chǎn)品。

AAT Bioquest  20530  Cal-630™ AM  5x50 ug

AAT Bioquest  20531  Cal-630™ AM  10x50 ug

 AAT Bioquest Cal-630™ AM

AAT Bioquest  20530  Cal-630™ AM  5x50 ug，產(chǎn)品說明：

鈣測量對于許多生物學(xué)研究至關(guān)重要。結(jié)合鈣時顯示光譜響應(yīng)的熒光探針使研究人員能夠通過使用熒光顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、熒光光譜和熒光酶標(biāo)儀來研究細(xì)胞內(nèi)游離鈣濃度的變化。x-Rhod-1通常用作紅色熒光鈣指示劑。然而，x-Rhod-1在酯酶水解后僅在活細(xì)胞中發(fā)出中等熒光，并且具有非常小的細(xì)胞鈣反應(yīng)。Cal-630™ 的開發(fā)旨在改善 x-Rhod-1 細(xì)胞負(fù)載和鈣響應(yīng)，同時保持 x-Rhod-1 的光譜波長，使其與德克薩斯紅®濾光片組兼容。在CHO和HEK細(xì)胞中，Cal-630™ AM具有比x-Rhod-1更敏感的細(xì)胞鈣反應(yīng)。Cal-630的光譜與FITC、Alexa Fluor 488和GFP的光譜分離良好，使其成為使用GFP細(xì)胞系或FITC/Alexa Fluor®® 488標(biāo)記抗體進行細(xì)胞內(nèi)檢測的理想鈣探針。

平臺

熒光顯微鏡

Excitation Texas Red

Emission Texas Red

推薦板 黑色墻壁/透明底部

熒光酶標(biāo)儀

Excitation 600

Emission 640

Cutoff     630

推薦板 黑色墻壁/透明底部

儀器規(guī)格 底部讀取模式/可編程液體處理

示例協(xié)議

儲備溶液的制備

除非另有說明，否則所有未使用的儲備溶液應(yīng)分成一次性等分試樣，并在制備后儲存在-20°C。避免反復(fù)凍融循環(huán)。

Cal-630™ AM 庫存解決方案

在高質(zhì)量無水DMSO中制備2至5 mM的Cal-630™ AM儲備溶液。

工作溶液的制備

Cal-630™ AM 工作解決方案

在實驗當(dāng)天，將Cal-630™ AM溶解在DMSO中或?qū)⒅甘緞﹥淙芤旱牡确衷嚇咏鈨鲋潦覝亍Ｔ谀x擇的緩沖液（例如，Hanks 和 Hepes 緩沖液）中制備含有 2.20% Pluronic® F-0 的染料工作溶液。對于大多數(shù)細(xì)胞系，建議使用終濃度為04-127μM的Cal-630™ AM。細(xì)胞上樣所需指標(biāo)的確切濃度必須根據(jù)經(jīng)驗確定。

注意 非離子洗滌劑Pluronic® F-4有時用于增加Cal-5™ AM的水溶性。各種Pluronic® F-127解決方案可以從AAT Bioquest購買。

注意 如果您的細(xì)胞含有有機陰離子轉(zhuǎn)運蛋白，則可以將丙huang舒（630-127 mM）添加到染料工作溶液中（最終孔濃度為1.2-0 mM），以減少脫酯指示劑的泄漏。多種ReadiUse™丙huang舒產(chǎn)品，包括水溶性、鈉鹽和穩(wěn)定溶液，均可從AAT Bioquest購買。

實驗方案樣本

以下是我們推薦的將AM酯加載到活細(xì)胞中的方案。此協(xié)議僅提供指南，應(yīng)根據(jù)您的特定需求進行修改。

1. 在生長培養(yǎng)基中制備細(xì)胞過夜。

2. 第二天，將 1X Cal-630™ AM 工作溶液添加到細(xì)胞板中。

注意 如果您的化合物干擾血清，請在上樣染料之前用新鮮的 HHBS 緩沖液替換生長培養(yǎng)基。

3. 將裝載染料的板在37°C的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育30至60分鐘。

注意 孵育染料超過 2 小時可以提高某些細(xì)胞系的信號強度。

4. 用您選擇的HHBS或緩沖液（含有陰離子轉(zhuǎn)運蛋白抑制劑，如1 mM丙huang舒，如果適用）替換染料工作溶液，以去除任何多余的探針。

5. 根據(jù)需要添加xing奮劑，并使用配備德州紅濾光片組的熒光顯微鏡或包含可編程液體處理系統(tǒng)（如FDSS，F(xiàn)LIPR或FlexStation）的熒光板讀數(shù)器同時測量熒光，Ex / Em = 600 / 640 nm截止值630nm。

AAT Bioquest  20531  Cal-630™ AM  10x50 ug，產(chǎn)品說明：

熒光顯微鏡

興奮 德州紅

排放 德州紅

推薦板 黑色墻壁/透明底部

熒光酶標(biāo)儀

興奮 600

排放 640

近路 630

推薦板 黑色墻壁/透明底部

儀器規(guī)格 底部讀取模式/可編程液體處理

Calbryte 520，Calbryte 590和Calbryte 630提供 zui 強大的均勻熒光測定工具，用于檢測細(xì)胞內(nèi)鈣動員。與現(xiàn)有的鈣指示劑（如Fluo-3 AM，F(xiàn)luo-4 AM和Rhod-2 AM）相比，這些鈣敏感染料明顯更亮，并提供更高的信噪比，大大提高了細(xì)胞內(nèi)保留和負(fù)載效率。表達通過鈣發(fā)出信號的GPCR或鈣通道的細(xì)胞可以預(yù)裝載可以穿過細(xì)胞膜的Calbryte 520 AM，Calbryte 590 AM或Calbryte 630 AM。一旦進入細(xì)胞內(nèi)，Cal520 AM，Calbryte 590 AM或Calbryte 630 AM的親脂性阻斷AM基團被細(xì)胞內(nèi)酯酶切割，產(chǎn)生帶負(fù)電荷的熒光Calbryte 染料，留在細(xì)胞內(nèi)。它們與鈣結(jié)合后的熒光大大增強。當(dāng)用激動劑刺激細(xì)胞時，該受體表示細(xì)胞內(nèi)鈣的釋放，這顯著增加了Calbryte 520，Calbryte 590或Calbryte 630的熒光。高靈敏度和> 100倍熒光增強的特性使Calbryte 520 AM， Calbryte 590 AM或Calbryte 630 AM是測量細(xì)胞內(nèi)鈣的 zui 強大指標(biāo)。

除了方便的激發(fā)波長和鈣的大熒光增強外，Calbryte 520，Calbryte 590和Calbryte 630主要定位于細(xì)胞溶膠中，不像Rhod-2主要位于線粒體中。 此外，Calbryte 590和Calbryte 630的長Ex / Em波長使這些染料成為wan美的鈣指示劑，可與綠色熒光蛋白（GFP）細(xì)胞系進行多色檢測。 此外，Calbryte 520，Calb ryte 590或Calbryte 630鈣測定經(jīng)過優(yōu)化，可與大多數(shù)現(xiàn)有熒光儀器兼容。 Calbryte 520可在488 nm處激發(fā)，并與FITC濾光片組配合使用。 Calbryte 590經(jīng)過優(yōu)化，可在555 nm激發(fā)，并與TRITC / Cy3濾光片組配合使用。 Calbryte 630經(jīng)過優(yōu)化，可在594 nm激發(fā)，并與TexasRed®濾光片組配合使用。

儲存

儲存條件：冷凍（<-15°C）;盡量減少光照

  AAT Bioquest Cal-630™ AM

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